>> 新闻分类   公司动态 | 文化长廊 | 行业新闻 | 技术前沿 | 服务与支持
您的位置 内蒙古快3走势图 >> 新闻资讯 >> 技术前沿 >> 正文阅读
热门文章
推荐阅读
产品链接

气相色谱法快速分析人唾液中7种短链脂肪酸(三)

【来源/作者】北纳创联 【更新日期】2016-08-10

1. 结果与讨论

1.1 样品处理条件的优化

短链脂肪酸为酸性化合物,在溶液中存在离子型和游离型两种状态 ,加入适量 HCl 酸化,使短链脂肪酸处于游离态,有利于测定,合适的酸性条件可改善色谱分离度及峰形,因此在样品处理过程中加入浓 HCl 酸化唾液样品。 考察了唾液供试品溶液中浓 HCl 浓度(0. 1%, 0. 5%, 1. 0%,V/ V)、唾液样品与稀释液比例(1:0. 5, 1:1, 1:2, V/ V)的影响。 当唾液供试品溶液中浓 HCl 浓度为 1. 0%时,丁酸色谱峰拖尾严重,无法准确定量; 当浓 HCl 浓度为0. 5%时,各短链脂肪酸的色谱峰形、分离度最优。 唾液样品与稀释液体积比为 1:0. 5 时,乙酸色谱峰拖尾严重; 唾液样品与稀释液体积比为 1:1 时,各短链脂肪酸的色谱峰形、分离度最优。 综合考虑,确定唾液样品处理方法为唾液样品与稀释液(1% (V/ V) 浓HCl-乙醇溶液)以体积比 1:1 混合并涡旋混匀, 14000 r/ min 离心 10 min,取上清液直接进行 GC 分析。

1.2 方法学验证

将空白溶液(0. 5% 浓 HCl-50% 乙醇溶液)、唾液供试品溶液和混合标准品溶液按照实验部分1.4节气相色谱条件分析,色谱图如图 1 所示。 可见,空白溶液和唾液中其它物质色谱峰均不干扰短链脂肪酸分析。

将混合标准品溶液逐级稀释成系列标准品溶液,以标准品浓度 x(μg/ mL)为横坐标,以对照品与内标物的峰面积比值 y 为纵坐标,绘制标准曲线,7 种短链脂肪酸在相应浓度范围内线性良好,相关系数R2 ≥0. 999,检出限(S/ N≥3)和定量限(S/ N≥10)分别为 0. 060 ~0. 198 μg/mL,0. 180 ~0. 594 μg/ mL;在方法学研究中,唾液中未检测到戊酸己酸,故以 0. 589 μg/ mL 戊酸和0. 615 μg/ mL己酸的混合标准品溶液(内标浓度为4. 38 μg/ mL)进行日内、日间精密度和稳定性实验,结果见表1。 7 种短链脂肪酸的日内精密度(相对标准偏差,RSD)和日间精密度 RSD 分别为 0. 7% ~ 3. 5%和 1. 9% ~4. 4%。 唾液供试品溶液室温条件下放置 12 h 内稳定性良好,RSD 为 2. 3% ~3. 6%。

准确吸取适量标准品溶液至健康志愿者的唾液样品中,按照实验部分1.3节方法制备供试品溶液,进行分析,7 种短链脂肪酸的加样回收率为 94. 8% ~109. 7%, RSD 为 1. 7% ~4. 3%,结果见表 2。

1.3 健康志愿者的唾液样品中短链脂肪酸分析

在方法学验证的基础上,采用本方法测定了 41 例健康志愿者唾液样品中7 种短链脂肪酸的含量,结果为:乙酸13. 1 ~ 378μg / mL;丙酸1.62 ~ 101. 6μg / mL;异丁酸0. 647 ~ 6. 03μg / mL;丁酸0. 644 ~18. 2 μg/ mL; 异戊酸 0. 859 ~9. 86 μg/ mL; 部分唾液样品中检测到戊酸己酸,且大部分样品中戊酸己酸含量在定量限以下。

仅一例样品中检测到戊酸, 含量为0. 359 μg/ mL; 7 种短链脂肪酸总量为15. 4 ~507 μg/ mL。 由于7 种短链脂肪酸的含量差异悬殊,因此绘制了 41 例健康志愿者唾液样品中 7 种短链脂肪酸的含量分布箱图(图 2A),更直观地显示出唾液样品中 7 种短链脂肪酸含量均在一定范围内波动,其原因可能是个体在饮食、肠道功能、肠道菌群种类及活力等方面的差异,导致产生的短链脂肪酸含量差异,最终影响了唾液中短链脂肪酸含量。 以乙酸为例,41 例健康志愿者唾液样品中乙酸含量分布如图 2B 所示,含量在20 ~150 μg/ mL 的样品例数占 78. 0%,含量低于20 μg/ mL 的占4. 9%,含量高于 150 μg/ mL 的占17. 1%。 人体唾液蕴含大量生理信息,唾液中的成分来源途径广,如腮腺、牙龈龈沟液、舌下和体液交换过程中的主动运输或被动扩散,所以作为一个开放的环境,检测唾液中的成分能反映身体的健康和疾病状况。 唾液中的短链脂肪酸有利于保持口腔的偏酸性环境,有利于抑制有害菌的滋生,从而保持健康的口腔环境。 测定唾液中的短链脂肪酸也有可能成为未来监测人体健康状况的一种简捷的辅助性手段。

如酸的比例分布图表明: 唾液样品中乙酸占短链脂肪酸的75. 5%,丙酸占17. 4%,丁酸占3. 1%,三者占短链脂肪酸的 96. 0%,与文献报道的人的粪便、血液中的结果基本一致; 异丁酸、异戊酸和戊酸占短链脂肪酸的 4. 0%。 原因可能是,在哺乳动物体内,肠腔内产生的乙酸,大部分经血液运输至外周,被外周组织利用; 另一部分乙酸丙酸被运输至肝脏,乙酸参与合成长链脂肪酸、谷氨酸等,丙酸进行糖异生作用。 丁酸则主要作为能量物质被肠道利用,而异丁酸异戊酸戊酸肠道菌群发酵某些特定的多肽氨基酸产生。

上述实验结果表明, 本方法简单、快速、准确,可用于人的唾液中短链脂肪酸的分析。

来源:分析化学《气相色谱法快速分析人唾液中 7 种短链脂肪酸》

作者:赵晓亚 1,2、 王跃飞 1,2、 杨 帆 1,2、 江振作 1,2、 王 琰 1,2、杨 龙 1,2、 潘赞红 3

(1. 天津中医药大学, 天津市现代中药重点实验室, 天津 300193;2. 天津国际生物医药联合研究院, 中药新药研发中心, 天津 300457; 3. 天津市第二人民医院, 天津 300192)

来源:北京标准物质网


【关键词】脂肪酸 丁酸 乙酸 异戊酸 氨基酸 异丁酸 标准物质 北京标准物质网 

<< 上一篇:气相色谱法快速分析人唾液中7种短链脂肪酸(二)

>> 下一篇:离子液体-固相萃取-高效液相色谱法等检测人参中三嗪类除草剂(一)

500万彩票 八马彩票 爱拼彩票平台 内蒙古快3 118彩票 内蒙古快3走势图 爱尚彩票计划软件 双赢彩票平台 爱尚彩票平台 106彩票